Yazar:
Tamara Smith
Yaratılış Tarihi:
22 Ocak Ayı 2021
Güncelleme Tarihi:
1 Temmuz 2024
İçerik
Bir pipet, çok az miktarda sıvıyı ölçmek ve aktarmak için kullanılan bir tür laboratuvar ekipmanıdır. Pipet ölçümünde doğruluk ve kesinlik gereklidir çünkü iletilen hacimlerdeki herhangi bir sapma, bir deneyin sonuçlarını etkileyebilir. Doğruluğu sağlamak için pipet kalibrasyonunu birkaç ayda bir kontrol etmek gerekir. Kalibrasyon süreci, ekipmanın doğru hacimleri dağıttığını doğrulamaya yardımcı olur, böylece değilse geri yüklenebilir.
Adım atmak
Bölüm 1/2: Kalibrasyonu kontrol etme
Gerekli malzemeleri toplayın. Bir pipetin kalibrasyonunu kontrol etmek için bir pipet, pipet uçları, damıtılmış su, beher, termometre, terazi ve kaplara ihtiyacınız vardır. Terazi, maksimum 1 µl'lik mikropipetleri kalibre etmek için mikrograma özgü olmalıdır. - 5 ml'den fazla suya ihtiyacınız yok. Bardağı suyla doldurun.
- Pipet uçlarının düzgün oturduğundan emin olun.
Damıtılmış suyun sıcaklığını ölçün. Termometreyi suya yerleştirin ve en az bir dakika bekletin. Termometredeki kırmızı çizgi hala hareket ediyorsa, bir dakika daha bırakın. Bir dakika sonra sıcaklığı bir deftere yazın. Termometreyi çıkarın ve işiniz bittiğinde kurulayın. - Kalibrasyonu kontrol etmek için yapılan hesaplamalarda suyun sıcaklığı önemlidir.
Teraziyi teraziye yerleştirin ve sıfıra ayarlayın. İdeal olarak, kapılar ve yalıtımlı bir oda ile bir denge kullanırsınız. Kaseyi odaya yerleştirin ve kapıları kapatın. Kapak yoksa, kaseyi terazinin üzerine koyun. "Sıfır" veya "Dara" düğmesine basın ve terazinin sıfırı okumasını bekleyin. - Terazinin sıfıra ayarlanmasıyla plastik kasenin ağırlığı hesaba katılmaz ve yalnızca kaseye koyduğunuz şeyin ağırlığını ölçmek mümkün olur.
Pipeti kalibrasyon için hazırlayın. Başlamadan önce, herhangi bir kontaminantı öldürmek için pipeti etanol ile silin - ayrıca pipet ucunun tıkanmadığından emin olun. Doğru ucu uca yerleştirin ve test etmek istediğiniz hacmi ayarlayın. - Kalibrasyondan önce, pipetin dağıtabileceği hem en küçük hem de en büyük hacmi test edersiniz.
Kalibre etmeden önce ucu yıkayın. Düğmeyi ilk durağa kadar itin ve ucu, yaklaşık 2 mm'si sıvıya batacak şekilde damıtılmış suya yerleştirin. Biraz sıvı çekmek için düğmeyi bırakın, ardından düğmeyi aşağı iterek sıvıyı tekrar dağıtın. Ucu yıkamak için bunu üç kez tekrarlayın. - Uçta kalan sıvıyı dağıtmak için düğmeyi ikinci durağa kadar itin ve pipeti sudan çıkarın.
Kalibrasyon hacmini çizin. Uç sıvıdan çıkmış haldeyken, düğmeyi ilk durağa kadar itin. Distile suya uçtan yaklaşık 2 mm uzağa yerleştirin ve sıvıyı uca çekmek için düğmeyi bırakın. Ucu sudan çıkarmadan önce yaklaşık bir saniye bekleyin. - Tüm aspirasyon işlemi sırasında ucun tamamen suya battığından emin olun. Bahşişte kabarcıklar istemezsiniz, yoksa sonuç doğru olmaz.
Terazide kaptaki sıvıyı dozlayın. Ucu kasenin dibine yerleştirin ve düğmeyi ilk durdurma noktasına kadar itin. Sudan biraz uzaktaki başka bir noktaya gidin ve ikinci durağa kadar düğmeye basın. Düğmeyi basılı tutun ve kasenin ucunu kaldırın. - Ucu pipet üzerinde tutun, çünkü daha fazla kalibrasyon testi yapmak için tekrar kullanacaksınız. Ucun hiçbir şeye değmediğinden emin olun.
Teraziyi gösteren ağırlığı kaydedin. İzole bir odada terazi kullanıyorsanız kapıyı kapatın. Değerlerin değişmesinin durmasını bekleyin. Bu değeri not defterinize kaydedin. - Yazmadan önce numaranın sabitlenmesini beklemek önemlidir. Beklemezseniz okumalarınız yanlış olacaktır.
En az 10 ölçüm alana kadar bu işlemi tekrarlayın. Teraziyi sıfıra ayarlayın, ucu yıkayın, aynı hacmi çekin, hacmi dağıtın ve ardından ağırlığı kaydedin. Aynı ciltte birden fazla kayda ihtiyacınız var ve ardından tüm kayıtların ortalamasını birlikte alabilirsiniz. - Hacim başına birden fazla ölçüm yaptığınız sürece aynı işlemi farklı hacimlerde tekrarlayabilirsiniz.
Bölüm 2/2: Sonuçların hesaplanması
Hesaplanan hacim için formülü kullanın. Pipet tarafından verilen hacmi hesaplama formülü, V = w * Z şeklindedir, burada w suyun ağırlığıdır, Z suyun yoğunluğuna dayalı dönüşüm faktörüdür ve V, ne kadar su miktarının hesaplanan hacmidir. teslim edildi. - Deneyin başında kaydedilen sıcaklığı kullanarak suyun yoğunluğuna bakarak Z değişkenini bulabilirsiniz.
- Örneğin: Suyun sıcaklığı 23 ° C ise, 1.0035 µg / mg'lık bir Z değeri varsayarsınız.
Tekrarlanan denemelerin ortalamasını hesaplayın. Pipetle dağıtılan su hacmini en az 10 kez tartmış olmalısınız. Tüm bu değerlerin ortalamasını hesaplamak için, onları toplayın ve 10'a bölün. Daha fazla veya daha az deneme yaptıysanız, her bir denemeyi ekleyin ve toplamı toplam deneme sayısına bölün. - Örneğin: 10 µl pipet hacmi için kaydettiğiniz on ağırlık şu şekildedir: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 ve 9.98.
- Ortalama: (9.89 + 10.01 + 10.02 + 9.99 + 9.95+ 10.04 + 9.96 + 10.01 + 9.99 + 9.98) / 10 = 99, 84/10 = 9.984
Değişkenleri denkleme uygulayın ve çözün. Her değişken için doğru değerleri belirledikten sonra, bunları denkleme dahil edebilir ve hesaplanan hacmi çözebilirsiniz. Bunu çözmek için, tüm test değerlerinin ortalama ağırlığını Z değeri ile çarpmanız yeterlidir. - Örneğin: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
Pipetin doğruluğunu hesaplayın. Doğruluğu hesaplamak için A = 100 x V denklemini kullanabilirsiniz.ort/ V0 burada A, pipetin hassasiyeti, V.ort ortalama hesaplanan hacim ve V.0 pipet için belirlediğiniz değer. Doğruluk% 99-101 arasında olmalıdır. - Pipet uygun şekilde kalibre edilmişse, hesaplanan değer pipette ayarladığınız gerçek değere çok yakın olmalıdır.
- Örneğin: A = 100 x Vort/ V0 = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 =% 100,19
- Bu pipet uygun şekilde kalibre edilmiştir.
Gerekirse pipeti kalibrasyon için gönderin. Pipetiniz kalibrasyon testini geçemezse, deneyler için kullanmayı hemen bırakın. Pipetler, laboratuvar ekipmanlarının çok hassas ve pahalı parçalarıdır. Kalibrasyonu kendiniz tamir edemezsiniz, bu nedenle uygun bakım için göndermeniz gerekecektir. Alternatif olarak, bazı şirketler laboratuvarınıza gelecek ve pipetlerinizi orada kalibre edecek. - Bakım için, özel pipet markanızı üreten şirketle iletişime geçin.
